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R 1752

:2013

(1)

目  次

ページ

序文  

1

1

  適用範囲  

1

2

  引用規格  

1

3

  用語及び定義  

2

4

  抗菌効果  

3

4.1

  可視光応答形単味光触媒抗菌加工平板状製品  

3

4.2

  可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工平板状製品  

3

5

  試験の種類  

3

6

  試験に用いる細菌  

4

7

  試験の準備  

4

7.1

  細菌の取扱い時の条件  

4

7.2

  薬品,材料及び器具  

4

7.3

  殺菌方法  

5

7.4

  培地など  

5

7.5

  試験装置の構成  

6

8

  試験片  

6

8.1

  試験片の採取  

6

8.2

  試験片の清浄化  

7

8.3

  試験片の設置  

7

9

  フィルム密着法  

8

9.1

  細菌の準備  

8

9.2

  試験菌液の接種  

8

9.3

  試験片の光照射  

9

9.4

  試験菌液を接種した試験片の暗所での保存  

9

9.5

  生菌数の測定  

10

10

  試験結果の計算  

10

10.1

  試験成立条件の判定  

10

10.2

  可視光応答形単味光触媒抗菌加工平板状製品又は 

    可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工平板状製品の抗菌活性値の計算  

11

10.3

  可視光応答形単味光触媒抗菌加工平板状製品又は 

    可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工平板状製品の光照射による効果の計算  

11

11

  試験結果の報告  

12

12

  表示  

13

附属書 A(規定)ハイブリッド可視光応答形光触媒抗菌加工平板状製品の 

    光が当たらない環境での抗菌性試験方法・抗菌効果  

14


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まえがき

この規格は,工業標準化法第 12 条第 1 項の規定に基づき,一般社団法人日本ファインセラミックス協会

(JFCA)から,工業標準原案を具して日本工業規格を制定すべきとの申出があり,日本工業標準調査会の

審議を経て,経済産業大臣が制定した日本工業規格である。

この規格は,著作権法で保護対象となっている著作物である。

この規格の一部が,特許権,出願公開後の特許出願又は実用新案権に抵触する可能性があることに注意

を喚起する。経済産業大臣及び日本工業標準調査会は,このような特許権,出願公開後の特許出願及び実

用新案権に関わる確認について,責任はもたない。


日本工業規格

JIS

 R

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ファインセラミックス−可視光応答形光触媒抗菌

加工製品の抗菌性試験方法・抗菌効果

Fine ceramics (advanced ceramics, advanced technical ceramics)-

Test method for antibacterial activity of photocatalytic products and efficacy

under indoor lighting environment

序文 

光触媒は,光照射下で防汚,防曇,抗菌,空気浄化,汚染物質の分解・除去などの機能を示し,近年そ

の応用が拡大している。近年,室内環境問題への関心の高まりとともに,光触媒材料の室内用途が検討さ

れている。しかしながら,従来の紫外線だけに応答する光触媒では効果が不足することから,室内光に多

く含まれる可視光を利用して室内でも高い光触媒効果を得ることのできる“可視光応答形光触媒”の研究

開発が進められた。その結果,近年では実用的な可視光応答形光触媒が商品化されるに至ったが,その特

性に応じた試験方法の制定が望まれていた。このため,この規格は,可視光応答形光触媒抗菌加工製品の

抗菌性能を客観的に評価する方法として提供することを目的として制定された。

1998 年 12 月,抗菌加工製品ガイドライン(通商産業省生活産業局生活関連新機能加工製品懇談会報告

書)において,抗菌性試験方法及び抗菌効果の規定に関する指針が示されており,この規格もこのガイド

ラインを踏まえて制定されている。この規格は,可視光応答形光触媒抗菌加工製品の抗菌性試験方法・抗

菌効果及び製品への表示を規定したものであり,安全性,抗菌効果の持続性などについては,抗菌加工製

品ガイドラインを参照する必要がある。

適用範囲 

この規格は,可視光応答形光触媒を含有する抗菌加工製品について,室内環境など可視光が照射されて

いる条件での試験方法,抗菌効果及び表示について規定する。ただし,可視光応答形光触媒を含有する抗

菌加工繊維製品は除く。

引用規格 

次に掲げる規格は,この規格に引用されることによって,この規格の規定の一部を構成する。これらの

引用規格は,その最新版(追補を含む。

)を適用する。

JIS C 1609-1

  照度計  第 1 部:一般計量器

JIS K 0950

  プラスチック製滅菌シャーレ

JIS K 0970

  ピストン式ピペット

JIS K 3800

  バイオハザード対策用クラス II キャビネット

JIS K 8101

  エタノール(99.5)

(試薬)


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JIS P 3801

  ろ紙(化学分析用)

JIS R 1600

  ファインセラミックス関連用語

JIS R 1702

  ファインセラミックス−光触媒抗菌加工製品の抗菌性試験方法・抗菌効果

JIS R 1709

  ファインセラミックス−紫外線励起形光触媒試験用光源

JIS R 1750

  ファインセラミックス−屋内照明環境で用いる光触媒試験用光源

JIS R 3505

  ガラス製体積計

JIS R 3644

  ガラス管類

JIS R 3645

  ガラス棒

JIS Z 2801

  抗菌加工製品−抗菌性試験方法・抗菌効果

用語及び定義 

この規格で用いる主な用語及び定義は,JIS R 1600 及び JIS R 1702 によるほか,次による。

3.1

可視光

波長が 380 nm 以上 780 nm 未満の範囲の光。

3.2

可視光応答形光触媒

光触媒のうち,可視光だけの照射下においても諸機能を発現する物質。

3.3

可視光応答形光触媒抗菌加工

可視光応答形光触媒の抗菌機能を利用するために,可視光応答形光触媒で抗菌加工すること。可視光応

答形単味光触媒抗菌加工及び可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工に分類される。

3.4

可視光応答形単味光触媒抗菌加工

可視光応答形光触媒抗菌加工のうち,塗布,含浸,練り込みなど種々の方法によって可視光応答形光触

媒を担持すること。また,可視光照射下での可視光応答形光触媒の抗菌性を増強するために,可視光応答

形光触媒と抗菌性のない他の機能性物質とを組み合わせた材料を担持することも含む。

3.5

可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工

可視光応答形光触媒抗菌加工のうち,可視光が当たらない環境においても抗菌機能を発現させるために,

可視光応答形光触媒と抗菌性のある他の機能性物質とを組み合わせた材料を塗布,

含浸,

練り込みなど種々

の方法によって担持すること。

3.6

可視光応答形光触媒抗菌加工平板状製品

可視光応答形光触媒抗菌加工した膜状,平板状などの製品。可視光応答形単味光触媒抗菌加工平板状製

品及び可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工平板状製品に分類される。

3.7

可視光応答形単味光触媒抗菌加工平板状製品

可視光応答形光触媒抗菌加工平板状製品のうち,可視光応答形単味光触媒抗菌加工した膜状,平板状な

どの製品。


3

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3.8

可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工平板状製品

可視光応答形光触媒抗菌加工平板状製品のうち,可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工した膜状,

平板状などの製品。

3.9

可視光応答形単味光触媒抗菌加工平板状製品又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工平板状製品

の抗菌活性値

可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工した平板状製品及び無

加工製品に細菌を接種し,光照射後の生菌数を測定し,無加工製品の生菌数の対数値と可視光応答形単味

光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工した平板状製品の生菌数の対数値との差。

この値には,光を照射しない条件で得られる生菌数の減少分も含まれる。

3.10

可視光応答形単味光触媒抗菌加工平板状製品又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工平板状製品

の光照射による効果

可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工した平板状製品に細菌

を接種し,光照射後の生菌数と暗所に置いた後の生菌数とを測定し,暗所に置いた後の生菌数の対数値と

光照射後の生菌数の対数値との差。

3.11

抗菌効果

3.9

(抗菌活性値)から判断される可視光応答形単味光触媒抗菌加工平板状製品又は可視光応答形ハイブ

リッド光触媒抗菌加工平板状製品の効果。

抗菌効果 

4.1 

可視光応答形単味光触媒抗菌加工平板状製品 

10.2

の式(3)によって算出した可視光応答形単味光触媒抗菌加工平板状製品の抗菌活性値が 2.0 以上とす

る。

なお,受渡当事者間の協議によって,2.0 を上回る数値を取り決めてもよい。

また,可視光応答形単味光触媒抗菌加工平板状製品の光照射による効果は,10.3 の式(4)によって算出す

る。

4.2 

可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工平板状製品 

10.2

の式(3)によって算出した可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工平板状製品の抗菌活性値が 2.0

以上,かつ,

附属書 によって算出した抗菌活性値が 2.0 以上とする。

なお,受渡当事者間の協議によって,2.0 を上回る数値を取り決めてもよい。

また,可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工平板状製品の光照射による効果は,10.3 の式(4)によっ

て算出する。

試験の種類 

可視光応答形光触媒による細菌に対する抗菌性を評価する試験の種類は次のとおりとし,評価する製品

の種類に応じて,

表 に示す適切な方法を選択する。

a)

フィルム密着法  可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工し


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た平板状製品の細菌に対する抗菌性を,可視光照射条件下で評価する試験方法。この試験方法は,箇

条 による。

b)

光が当たらない環境でのフィルム密着法  可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工平板状製品の細

菌に対する抗菌性を,光が当たらない環境で評価する試験方法。この試験方法は,

附属書 による。

表 1−試験の種類

試験条件

製品の種類

可視光応答形単味光触媒
抗菌加工平板状製品

可視光応答形ハイブリッド
光触媒抗菌加工平板状製品

可視光照射下

フィルム密着法

フィルム密着法

光 が 当 た ら な

い環境

光が当たらない環境でのフ

ィルム密着法

試験に用いる細菌 

試験に用いる細菌の種類は,次による。

a)

スタフィロコッカス・アウレウス(Staphylococcus aureus):黄色ぶどう球菌

b)

エシェリヒア・コリー(Escherichia coli):大腸菌

なお,試験に用いる細菌の菌株は,World Federation for Culture Collections(世界微生物株保存連盟)又は

日本微生物資源学会に加入している機関において保存されている

表 に示す同一系統の菌株を使用する。

表 2−試験に用いる細菌の菌株

細菌の種類

保存番号

保存機関名

スタフィロコッカス・アウレウス 
Staphylococcus aureus

ATCC 6538P

American Type Culture Collection (ATCC)

DSM 346

German Collection of Microorganisms and Cell Cultures (DSMZ)

NBRC 12732

独立行政法人製品評価技術基盤機構バイオテクノロジー本
部生物遺伝資源部門

エシェリヒア・コリー 
Escherichia coli

ATCC 8739

American Type Culture Collection (ATCC)

DSM 1576

German Collection of Microorganisms and Cell Cultures (DSMZ)

NBRC 3972

独立行政法人製品評価技術基盤機構バイオテクノロジー本

部生物遺伝資源部門

試験の準備 

7.1 

細菌の取扱い時の条件 

取り扱う微生物のバイオセーフティレベルに必要な設備が用意された実験室で試験する。

注記  ハザードレベル及び必要な設備については,国立感染症研究所病原体等安全管理規程などを参

考にする。

7.2 

薬品,材料及び器具 

試験に用いる薬品,材料及び器具は,特に指定がない限り,次による。

なお,試験管,フラスコ,ピペット,ピンセットなどは,アルカリ又は中性洗剤で丁寧に洗浄し,水で

十分すすぎ,乾燥してから乾熱殺菌又は高圧蒸気殺菌したものを用いる。

7.2.1

エタノール(C

2

H

5

OH

)  JIS K 8101 に規定する特級のもの。

7.2.2

綿栓  青梅綿を使用した栓,又はシリコン栓,金属栓,モルトン栓など。

7.2.3

シャーレ  内径約 90 mm のガラス製,又は JIS K 0950 に規定する 90A 号若しくは 90B 号に適合す


5

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るもの。

7.2.4

安全キャビネット  JIS K 3800 に適合又は同等の性能をもつもの。

7.2.5

白金耳  先端のループが約 4 mm のもの。

7.2.6

培養器  温度±1  ℃に保てるもの。

7.2.7

ガラス板  微生物の発育に影響を及ぼさない材質のもの。

7.2.8

ピペット  JIS K 0970 若しくは JIS R 3505 のクラス A に適合するもの又は同等の精度をもつもの。

7.2.9

試験管ミキサー  微生物試験用のもの。

7.2.10

ストマッカー袋  微生物試験用のもの。

7.2.11

密着フィルム  微生物の発育に影響を及ぼさない材質で,吸水性がなく,密着性がよく,厚みが

0.08 mm 以内で,JIS R 1702 に規定する方法で測定した波長 380∼780 nm の透過率が 90 %以上のもの。

7.2.12

保湿用ガラス  厚みが 1.1 mm 以内で,JIS R 1702 に規定する方法で測定した波長 380∼780 nm の

透過率が 90 %以上のガラス板をシャーレ全面が覆えるサイズに切断したもの。

7.2.13

保存シャーレ  内径約 90 mm の JIS K 0950 に規定する 90A 号又は 90B 号に適合するもの。

7.2.14

調湿用ろ紙  JIS P 3801 に規定する微生物の発育に影響を及ぼさないろ紙で,試験片を置く容器に

入るよう切断したもの。

7.2.15

ガラス管・ガラス棒  JIS R 3644 に規定するガラス管又は JIS R 3645 に規定するガラス棒を試験片

を置く容器に入るよう切断したもの。

7.2.16

光照射装置  JIS R 1702 に規定するもの。

7.2.17

蛍光ランプ  JIS R 1750 に規定する光源のうち,広帯域発光形蛍光ランプの普通形白色(W 形)

で,20 W 形のもの。

7.2.18

シャープカットフィルタ  JIS R 1750 に規定する Type A 又は Type B のシャープカットフィルタで,

幅約 350 mm,長さ約 700 mm の大きさに切断したもの。

7.2.19

照度計  JIS C 1609-1 に規定するもののうち,一般形 A 級以上のもの。

7.2.20

紫外線蛍光ランプ  JIS R 1709 に規定する波長 351 nm にピーク放射をもつブラックライトブルー

ランプ(BLB ランプ)で,20 W 形のもの。

7.2.21

紫外放射照度計  JIS R 1709 に規定する紫外放射照度計で,0.001 mW/cm

2

まで計測できるもの。

7.2.22

暗箱  容器内の照度が 10 lx 未満の蓋の付いたもの。

7.3 

殺菌方法 

7.3.1 

乾熱殺菌 

乾熱殺菌は,JIS R 1702 の 7.3.1(乾熱殺菌)による。

7.3.2 

高圧蒸気殺菌 

高圧蒸気殺菌は,JIS R 1702 の 7.3.2(高圧蒸気殺菌)による。

7.3.3 

火炎殺菌 

火炎殺菌は,JIS R 1702 の 7.3.3(火炎殺菌)による。

7.4 

培地など 

培地などは,次に示す組成のものを用いる。また,同一の組成のものであれば,市販品を用いることが

できる。

7.4.1

1/500

濃度普通ブイヨン培地(以下,1/500 NB という。) 1/500 NB は,JIS R 1702 の 7.4.1(1/500

濃度普通ブイヨン培地)による。

7.4.2

ニュートリエント寒天培地  ニュートリエント寒天培地は,JIS R 1702 の 7.4.3(ニュートリエン


6

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ト寒天培地)による。

7.4.3

斜面培地  斜面培地は,JIS R 1702 の 7.4.4(斜面培地)による。

7.4.4

SCDLP

培地  SCDLP 培地は,JIS R 1702 の 7.4.5(SCDLP 培地)による。

7.4.5

生理食塩水  生理食塩水は,JIS R 1702 の 7.4.6(生理食塩水)による。

7.4.6

普通寒天斜面培地  普通寒天斜面培地は,JIS R 1702 の 7.4.8(普通寒天斜面培地)による。

7.4.7

りん酸緩衝生理食塩水  りん酸緩衝生理食塩水は,JIS R 1702 の 7.4.10(りん酸緩衝生理食塩水)

による。

7.4.8

標準寒天培地  標準寒天培地は,JIS R 1702 の 7.4.11(標準寒天培地)による。

7.5 

試験装置の構成 

7.5.1 

一般事項 

試験装置は,試験片に可視光を照射して抗菌性を評価するもので,7.2.16 の光照射装置,7.2.17 の蛍光ラ

ンプ及び 7.2.18 のシャープカットフィルタで構成し,シャープカットフィルタは蛍光ランプの直下に取り

付ける。

7.5.2 

シャープカットフィルタ 

製品が使用される状況を想定して,使用するフィルタ(試験条件)を選択する。

なお,シャープカットフィルタを用いずに試験する場合は,次の a)又は b)の条件と組み合わせて試験し

なければならない。

a)  JIS R 1750

で規定する Type A のシャープカットフィルタを使用する(条件 A)

b)  JIS R 1750

で規定する Type B のシャープカットフィルタを使用する(条件 B)

試験片 

8.1 

試験片の採取 

試験片の採取は,次による。

a)

平板状製品の平らな部分を 50±2 mm 角(厚さ 10 mm 以内)の正方形に切り取り,これを標準の大き

さの試験片とする。ただし,平板状製品を 50±2 mm 角(厚さ 10 mm 以内)の正方形に切り取ること

が困難又は不可能な場合,表面積 800∼1 600 mm

2

の密着フィルム(

図 参照)をかぶせることが可能

な試験片の大きさであれば,ここに規定する形状及び大きさ以外の試験片を使用してもよい。また,

試料表面が有機物で汚染されている場合は,1.0 mW/cm

2

程度の紫外線蛍光ランプを 24 時間を上限と

して照射し,有機物を除去する予備作業をしてもよい。

b)

これらの試験片を,可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工

していない試験片(無加工試験片)は 9 個(3 個は試験菌液接種直後の生菌数測定用に,3 個は所定時

間光照射後の生菌数測定に,残りの 3 個は所定時間暗所放置後の生菌数測定に用いる。

,可視光応答

形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工した試験片は 6 個(3 個は所定

時間光照射後の生菌数測定に,残りの 3 個は所定時間暗所放置後の生菌数測定に用いる。

)準備する。

c)

可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工していない試験片

(無加工試験片)が準備できない場合は,7.2.7 のガラス板を使用してもよい。試験片の調製に当たっ

ては微生物汚染,製品間の相互汚染及び汚れに十分注意する。試験片は製品そのものから採取するこ

とが望ましいが,製品の形状から試験片の調製が困難な場合は,同じ原材料及び加工方法で別途平板

状に加工したものから試験片を調製してもよい。

d)

無加工試験片が所定枚数用意できない場合であって,6 個準備できる場合には,9.3 及び 9.4 の試験に


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使用し,試験液接種直後の生菌数測定用には 7.2.7 のガラス板を代用する。6 個準備できない場合は,

全てガラス板を使用する。

8.2 

試験片の清浄化 

8.1

の試験片の全面を,エタノールを吸収させた局方ガーゼ又は脱脂綿で軽く 2∼3 回拭いた後,十分に

乾燥する。

これらの処理をすることによって,試験片の軟化,表面の塗装の溶解,成分の溶出などの変化が起こり,

これらが原因で試験結果に影響を及ぼすと判断される場合においては,他の適切な方法を用いて清浄化す

るか,又は清浄化せずにそのまま試験に用いる。

8.3 

試験片の設置 

滅菌済保存シャーレの底に,滅菌した調湿用ろ紙を置き,滅菌水を適量入れ,試験片と調湿用ろ紙とが

触れないようガラス管又はガラス棒を置き,その上に可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形

ハイブリッド光触媒抗菌加工した面を上にして 8.2 の試験片を置く(

図 参照)。試験面は可視光応答形単

味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工した製品の表面とする。内部まで可視光

応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工した製品であっても,切断面は

試験面としない。また,高圧蒸気殺菌によってろ紙が湿った場合は,乾燥させてから使用する。

注記  滅菌水を入れすぎると,保湿用ガラスが曇り,試験に影響するので,4∼6 ml 程度が適切であ

る。

単位  mm

a)

  9.2 b)参照。

b)

  8.1 a)参照。

図 1−フィルム密着法試験片及び保湿用ガラスの組立


8

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フィルム密着法 

9.1 

細菌の準備 

9.1.1 

細菌の移植及び保存 

細菌の移植は,

次の手順によって無菌的に行う。

片手に元株と移植しようとする 7.4.3 の斜面培地を持ち,

他の手に白金耳の柄を持ち,その手で綿栓を抜き取り,試験管の口を火炎殺菌する。次に,白金耳を火炎

殺菌し,新しい斜面培地の凝結水のある部分に白金耳のループを差し込んでよく冷却してから,元株の試

験管に入れ,細菌の繁殖面から 1 白金耳をかきとり,新しい斜面培地に塗抹する。具体的には,

図 のよ

うに,凝結水に細菌を分散し,ここから斜面上方まで直線的に塗抹する。一旦培地から白金耳の先端を離

し,再び凝結水につけ,今度は蛇行させながら斜面上方まで塗抹する。再び試験管の口を火炎殺菌し,元

のように綿栓をする。使用後の白金耳は火炎殺菌する。細菌を移植した斜面培地は,37±1  ℃に設定した

培養器で 24∼48 時間培養し,その後は,温度 5∼10  ℃で保存する。細菌移植後,1 か月以内に次の移植を

同様に行い継代培養する。継代培養は菌株保存機関から分譲された元株から数えて 10 回を限度とする。ま

た,移植して 1 か月以上過ぎたものは,次の移植に用いてはならない。

なお,菌株保存機関から分譲された菌株を,凍結乾燥,凍結などの長期間保存可能な方法で保存した菌

株にあっては,保存菌株を作製するために元株から培養した継代回数を保存菌株の継代回数とする。この

保存菌株を試験に用いる場合は,10 回から保存菌株の継代回数を引いた回数を使用限度とする。

図 2−斜面培地への移植

9.1.2 

試験菌液の調製 

試験菌液の調製は,次による。

a)  9.1.1

の保存菌株から 7.4.2 のニュートリエント寒天培地に 1 白金耳移植し,温度 37±1  ℃に設定した

培養器で 16∼24 時間培養する。さらに,この培養菌から新たなニュートリエント寒天培地に 1 白金耳

移植し,温度 37±1  ℃に設定した培養器で 16∼20 時間培養する。

b)  a)

で前培養した試験菌の菌体 1 白金耳量を少量の 1/500 NB に均一に分散させ,顕微鏡による直接観察

又はその他の適切な方法によって菌数を測定する。この菌液を 1/500 NB を用いて適宜希釈し,菌数が

約 6.7×10

5

∼約 2.6×10

6

個/ml となるように調製し,これを試験菌液とする。試験菌液をすぐに使用し

ない場合は氷冷(0  ℃)保存し,保存 2 時間以内に使用する。

9.2 

試験菌液の接種 

試験菌液の接種は,次による。

a)  9.1.2 b)

の試験菌液をピペットで正確に 0.15 ml 採取し,これを 8.3 の各試験片に滴下する。標準の大き

さ以外の試験片の接種菌液量は,被覆した密着フィルムの面積比で案分する。また,標準の大きさの

試験片であっても,規定に基づく菌液量を接種したとき,フィルム全体に行きわたらなかったり,フ


9

R 1752

:2013

ィルムの端から菌液が漏れ出す場合がある。このような場合は,接種菌液の液量を規定量の 2 倍から

1/2 を限度に調整してもよい。ただし,試験片に接種する菌液は接種菌液量を少なくした場合におい

ても,標準の大きさの試験片の場合と同様に 1 試験片当たり 1.0×10

5

∼4.0×10

5

個とする。この場合,

試験菌液の菌数は,9.1.2 b)の規定によらず,接種菌液量から換算して調整する。

b)

滴下した試験菌液の上に密着フィルムをかぶせ,菌液が密着フィルムの端からこぼれないように注意

しながら試験菌液が密着フィルム全体に行きわたるように軽く押さえつけた後,保湿用ガラスを載せ

る(

図 参照)。密着フィルムの大きさは,40±2 mm 角の正方形を標準とする。試験片が標準の大き

さ以外の場合は,密着フィルムが試験片より 2.5 mm 以上内側となるように大きさを調整する。ただ

し,密着フィルムの大きさは 800 mm

2

より小さくしてはならない。このフィルムは,あらかじめ裁断

したものをエタノールで拭くか,又は,滅菌済みのフィルムを無菌的に裁断したものを用いる。また,

試験片の形状が平面ではなく密着フィルムを密着させることが困難な場合などにおいては,フィルム

をかぶせる操作を省略することができる。保湿用ガラスは,ガラスの全面を,エタノールを吸収させ

た局方ガーゼ又は脱脂綿で軽く 2∼3 回拭いた後,十分に乾燥してから使用する。

c)

試験菌液接種直後の生菌数測定用に使うものを除いて,9.3 及び 9.4 の試験をする。また,試験菌液接

種直後の生菌数は,9.5 の手順に従って測定する。

9.3 

試験片の光照射 

9.3.1 

照度の測定及び試験片設置位置の準備 

7.5

の試験装置の試験片表面と同じ高さに照度計の受光部基準面を据え付け,

受光部の上に試験に使用す

る密着フィルム及び保湿用ガラスを置く。指示値を読み取りながら,9.3.2 に規定する照度が得られる位置

を決め,試験片設置位置とする。

なお,照度を測定する場合は,照度を安定化させるため,試験装置の蛍光ランプを 15 分以上予備点灯し

ておく。

9.3.2 

光照射条件 

照度は,製品を使用する状況に応じて照度を設定して試験する。照度の指示がない場合は,1 000 lx を

標準条件とする。

なお,蛍光ランプから発生する熱による影響を避けるために,3 000 lx を上限とする。

注記  照度の設定については,JIS Z 9110JIS Z 9125,社団法人照明学会編  住宅照明設計技術指針

(JIEG-009)又は社団法人照明学会編  オフィス照明設計技術指針(JIEG-008)を参考にする

とよい。

9.3.3 

試験菌液を接種した試験片の光照射 

試験菌液を接種した試験片[可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗

菌加工していない試験片(無加工試験片)3 個及び可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハ

イブリッド光触媒抗菌加工した試験片 3 個]

の入った保存シャーレを温度 25±3  ℃で,

8 時間光照射する。

光照射後の生菌数は,9.5 の手順に従って測定する。

なお,可視光応答形光触媒抗菌加工製品が実際に使用される状況を考慮して,光照射時間を 4 時間を下

限として短くしてもよい。

9.4 

試験菌液を接種した試験片の暗所での保存 

試験菌液を接種した試験片[可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗

菌加工していない試験片(無加工試験片)3 個及び可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハ

イブリッド光触媒抗菌加工した試験片 3 個]の入った保存シャーレを温度 25±3  ℃で,9.3.3 と同じ時間,


10

R 1752

:2013

7.2.22

の暗箱の中に保存する。暗所で保存した後の生菌数は,9.5 の手順に従って測定する。

なお,保存シャーレを覆う保湿用ガラスの代わりに,保存シャーレの蓋を代用してもよい。

9.5 

生菌数の測定 

生菌数の測定は,次による。

a)

試験片[試験菌液を接種した直後においては,可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハ

イブリッド光触媒抗菌加工していない試験片(無加工試験片)3 個。9.3 又は 9.4 においては,可視光

応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工した試験片 3 個及び可視光

応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工していない試験片(無加工

試験片)3 個]について,密着フィルムと試験片とを菌液がこぼれないように注意しながら滅菌した

ピンセットを用いて滅菌済みストマッカー袋内に入れ,これにピペットで 7.4.4 の SCDLP 培地 10 ml

を加え,手で試験片及び密着フィルムを十分にもみ,試験菌を洗い出す。試験菌の洗い出しについて

は,この方法と同等又はそれ以上の回収率が認められる方法であれば他の方法を用いてもよい。

b)  a)

の洗い出し液を滅菌したピペットで 1.0 ml 採り,7.4.5 の生理食塩水 9±0.1 ml が入った試験管に加

え,試験管ミキサーなどで十分にかくはん(撹拌)する。さらに,この試験管から 1.0 ml を新しいピ

ペットで採り,生理食塩水 9±0.1 ml が入った別の試験管に加え,十分にかくはん(撹拌)する。こ

の操作を順次繰り返して,10 倍希釈法による希釈系列を作製し,各希釈系列の試験管からそれぞれ別

のシャーレ 2 枚に新しいピペットで 1.0 ml 採り,45∼48  ℃に保温した 7.4.2 のニュートリエント寒天

培地 15∼20 ml を入れ,蓋をして 15 分間室温で放置する。培地が凝固したら,シャーレを倒置し,37

±1  ℃に設定した培養器で 40∼48 時間培養する。培養後,30∼300 個のコロニーが現れた希釈系列の

シャーレのコロニー数を測定し,洗い出し液の生菌数を式(1)によって有効数字 2 桁まで求める。

N

Z×E×10  (1)

ここに,

N

生菌数(個)

Z

2 枚のシャーレのコロニー数の平均値(個)

E

希釈倍率

10: 洗い出しに用いた SCDLP 培地の液量(ml)

洗い出し液 1.0 ml を用いたシャーレの集落数が 30 個未満の場合は,測定した集落数をコロニー数とし

て生菌数を算出する。また,洗い出し液 1.0 ml を用いたシャーレから生残菌が認められない場合は,生菌

数は“<10”と表示し,箇条 10 では,

“10”を用いて計算する。

注記  ここで規定する以外の集落数の採用方法については,日本薬学会編  衛生試験法・注解(2010)

1.2 微生物試験法 1.2.1.1 細菌一般試験法 3)菌数測定(1)混釈平板培養法又は厚生労働省監修  食

品衛生検査指針微生物編(2004)第 2 章細菌 2 汚染指標菌 1.細菌数を参考にするとよい。

10 

試験結果の計算 

10.1 

試験成立条件の判定 

次の 4 項目の試験成立条件を全て満たすとき,その試験は有効と判定する。全ての条件を満足しない場

合は,試験不成立と判定し,再度試験を実施する。

a)

可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工していない試験片

(無加工試験片)の接種直後の生菌数の対数値について,次の式(2)が成立する。

(L

max

L

min

)/(L

mean

)≦0.2 (2)

ここに,  L

max

: 生菌数対数値の最大値

L

min

生菌数対数値の最小値


11

R 1752

:2013

L

mean

3 個の試験片の生菌数対数値の平均値

b)

可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工していない試験片

(無加工試験片)の接種直後の生菌数平均値は,1.0×10

5

∼4.0×10

5

個である。

c)

可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工していない試験片

(無加工試験片)の光照射後の生菌数は,3 個の値が全て 1.0×10

3

個以上である。ただし,可視光応

答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工していない試験片(無加工試

験片)にガラス板を用いた場合は,光照射後の生菌数の値が全て 1.0×10

4

個以上とする。

d)

可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工していない試験片

(無加工試験片)の暗所放置後の生菌数は,3 個の値が全て 1.0×10

3

個以上である。ただし,可視光

応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工していない試験片(無加工

試験片)にガラス板を用いた場合は,暗所放置後の生菌数の値が全て 1.0×10

4

個以上とする。

10.2 

可視光応答形単味光触媒抗菌加工平板状製品又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工平板状

製品の抗菌活性値の計算 

試験が成立した場合について,式(3)によって,試験した照度での可視光応答形単味光触媒抗菌加工平板

状製品又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工平板状製品の抗菌活性値を,小数点以下 2 桁目を切

り捨て,小数点以下 1 桁で求める。

なお,3 試験片の生菌数の平均値は,9.5 で求めた数値を用いて,有効数字 3 桁目を四捨五入して 2 桁で

表示する。

R

F-I

=[log(U

F-I

/U

S

)−log(T

F-I

/U

S

)]=log[U

F-I

/T

F-I

]  (3)

ここに,  R

F-I

照度条件 及び での可視光応答形単味光触媒抗菌加工平板状
製品又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工平板状製
品の抗菌活性値

F

試験で用いたシャープカットフィルタの種類(A 又は B)

I

試験で用いた照度(lx)

U

S

可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリ
ッド光触媒抗菌加工していない試験片(無加工試験片)の接
種直後の 3 試験片の生菌数の平均値(個)

U

F-I

可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリ
ッド光触媒抗菌加工していない試験片(無加工試験片)を照
度条件 F-I で 8 時間光照射した後の 3 試験片の生菌数の平均値
(個)

T

F-I

可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリ
ッド光触媒抗菌加工した試験片を照度条件 F-I で 8 時間光照射
した後の 3 試験片の生菌数の平均値(個)

10.3 

可視光応答形単味光触媒抗菌加工平板状製品又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工平板状

製品の光照射による効果の計算 

式(4)によって,可視光応答形単味光触媒抗菌加工平板状製品又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌

加工平板状製品の光照射による効果 Δを,小数点以下 2 桁目を切り捨て,小数点以下 1 桁で求める。

なお,3 試験片の生菌数の平均値は,9.5 で求めた数値を用いて,有効数字 3 桁目を四捨五入して 2 桁で

表示する。

ΔR=log[U

F-I

/T

F-I

]−[log(U

D

/U

S

)−log(T

D

/U

S

)]=log[U

F-I

/T

F-I

]−log[U

D

/T

D

] ··· (4)

ここに,

ΔR: 可視光応答形単味光触媒抗菌加工平板状製品又は可視光応答

形ハイブリッド光触媒抗菌加工平板状製品の光照射による効


12

R 1752

:2013

U

D

可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリ
ッド光触媒抗菌加工していない試験片(無加工試験片)を 8
時間暗所に保存した後の 3 試験片の生菌数の平均値(個)

T

D

可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリ
ッド光触媒抗菌加工した試験片を 8 時間暗所に保存した後の 3
試験片の生菌数の平均値(個)

11 

試験結果の報告 

試験結果の報告には,次の項目について記載する(

例 参照)。

a)

規格番号及び試験の種類

b)

可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工した試験片の種類・

大きさ

c)

可視光応答形単味光触媒抗菌加工又は可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工していない試験片

(無加工試験片)の種類・大きさ

d)

光源の種類,製造業者名及び品番

e)

予備照射条件(紫外線蛍光ランプの種類,製造業者名及び品番,照射時間など)

f)

照度計の製造業者名及び品番

g)

密着フィルムの種類・大きさ

h)

保湿用ガラスの種類

i)

光照射条件(照度,光照射時間)

j)

シャープカットフィルタの種類

k)

試験菌液の接種量

l)

試験に用いた菌種(細菌の保存番号)

m)

試験菌液の生菌数

n)

試験値(U

S

U

F-I

T

F-I

R

F-I

U

D

T

D

,ΔR,可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工した試験片の

場合は

附属書 によって算出した抗菌活性値も)

o)

その他必要な事項

例 1  試験結果

規格番号及び試験の種類

JIS R 1752

フィルム密着法

可視光応答形単味光触媒抗菌加工した
試験片の種類

光触媒フィルム,50 mm×50 mm

可視光応答形単味光触媒抗菌加工して
いない試験片(無加工試験片)の種類

PET フィルム,50 mm×50 mm

光源の種類

白色蛍光灯(○○電機,FL20S・W)

予備照射条件 FL20_BLB,1.0 mW/cm

2

で 24 時間予備照射

照度計

照度計(△△製作所,本体:FL-X,受光部:FL-Y)

密着フィルムの種類

ポリプロピレンフィルム(□□商会)

,40 mm×40 mm

保湿用ガラスの種類

ほうけい酸ガラス

光照射条件

1 000 lx で,8 時間

シャープカットフィルタの種類

タイプ A(波長 400 nm 以下をカット)

菌液接種量 0.10 ml

試験に用いた菌種(細菌の保存番号)

黄色ぶどう球菌(NBRC12732)

大腸菌(NBRC3972)

試験菌液の生菌数 2.0×10

6

 3.2×10

6


13

R 1752

:2013

U

S

 

2.0×10

5

 3.2×10

5

U

A-1000

 

3.2×10

5

 2.0×10

6

T

A-1000

 

5.0×10

2

 3.1×10

3

R

A-1000

 

2.8 2.8

U

D

 

3.5×10

5

 2.2×10

6

T

D

 

2.8×10

5

 1.8×10

6

Δ

2.7 2.7

12 

表示 

可視光応答形光触媒抗菌加工平板状製品には,次の事項をカタログ,及び製品又は包装に表示しなけれ

ばならない。

なお,表示スペースが足りないなどによって,製品又は包装への表示が困難な場合には,商品タグ,取

扱説明書など,商品に附属しているものに表示してもよい。

a)

規格番号及び試験の種類

b)

想定している使用場所

例 1  子供部屋,書斎,家事室,事務室,昼間の玄関ホールなど

c)

抗菌性能を想定どおりに発揮させるための使用方法

例 2  どのような光環境下に何時間程度暴露させることが必要かなど

d)

可視光応答形光触媒の種類及び可視光応答形光触媒以外の抗菌剤も使用している場合は,その旨及び

使用している抗菌剤の名称

例 3  銅イオン担持酸化タングステン

e)

抗菌効果

効果の記載例を,次に示す。

可視光応答形単味光触媒抗菌加工平板状製品においては 4.1 に規定する計算結果,可視光応答形ハ

イブリッド光触媒抗菌加工平板状製品においては 4.2 に規定する計算結果とする。

例 4  1 000 lx,8 時間試験条件での可視光応答形単味光触媒抗菌加工平板状製品の抗菌活性値  黄

色ぶどう球菌 2.8,大腸菌 2.8,1 000 lx,8 時間で試験した際の可視光応答形単味光触媒抗菌

加工平板状製品の光照射による効果  黄色ぶどう球菌 2.7,大腸菌 2.7


14

R 1752

:2013

附属書 A

(規定)

ハイブリッド可視光応答形光触媒抗菌加工平板状製品の

光が当たらない環境での抗菌性試験方法・抗菌効果

A.1 

適用範囲 

この附属書は,可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工平板状製品の可視光が当たらない環境での抗

菌性を測定する手順について,JIS Z 2801 の 5.6(試験操作)に規定する操作に代わる試験操作を規定する。

なお,ここに規定していない項目,箇条 3(用語及び定義)

5.7(生菌数の計算)

5.8(試験結果)

,箇

条 6(試験結果の記録)については,JIS Z 2801 による。また,抗菌効果については,JIS Z 2801 の箇条 4

(抗菌効果)に従う。

A.2 

概要 

JIS Z 2801

では,抗菌加工製品の抗菌性試験法及び抗菌効果について規定しているが,可視光の影響を

考慮していない。可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工平板状製品の可視光が当たらない環境での抗

菌性を測定するためには,光(可視光及び波長 300∼380 nm の光)の影響を排除しないと,可視光応答形

光触媒による抗菌性も含めて評価することになる。そこで,JIS Z 2801 に記載されている試験方法に,光

の影響を排除した試験条件で抗菌性を評価するために必要な手順を追記する。

A.3 

試験操作 

A.3.1 

一般事項 

取り扱う微生物のバイオセーフティレベルに必要な設備が用意された実験室で試験する。

注記  ハザードレベル及び必要な設備については,国立感染症研究所病原体等安全管理規程などを参

考にする。

A.3.2 

細菌の保存及び培養 

細菌の移植は,次の手順によって無菌的に行う。片手に元株と移植しようとする 7.4.6 の普通寒天斜面培

地を持ち,ほかの手に白金耳の柄を持ち,その手で綿栓を抜き取り,試験管の口を火炎殺菌する。次に,

白金耳を火炎殺菌し,新しい普通寒天斜面培地の凝結水のある部分に白金耳のループを差し込んでよく冷

却してから,元株の試験管に入れ,細菌の繁殖面から 1 白金耳をかきとり,新しい普通寒天斜面培地に塗

抹し,再び試験管の口を火炎殺菌し,元のように綿栓をする。使用後の白金耳は火炎殺菌する。細菌を移

植した斜面培地は,35±1  ℃で 24∼48 時間培養し,その後は,温度 5∼10  ℃で保存する。細菌移植後,1

か月以内に次の移植を同様に行い継代培養する。継代培養は菌株保存機関から分譲された元株から数えて

5 回を限度とする。また,移植して 1 か月以上過ぎたものは,次の移植に用いてはならない。

A.3.3 

試験菌の前培養 

A.3.2

の保存菌株から 7.4.6 の普通寒天斜面培地に 1 白金耳量を移植し,培養器中で温度 35±1  ℃で 16

∼24 時間培養する。さらに,この培養菌から新たな普通寒天斜面培地に 1 白金耳量を移植し,培養器中で

温度 35±1  ℃で 16∼20 時間培養する。

A.3.4 

試験に用いる安全キャビネット,容器及び培養器の評価(照度及び紫外放射照度の測定) 

試験に用いる安全キャビネット,容器及び培養器の評価は,次による。


15

R 1752

:2013

a)

試験片を取り扱う A.3.6A.3.8 及び A.3.10 の作業を行う際に,安全キャビネット内に漏れる光によっ

て可視光応答形光触媒作用が働かないことを確実にするため,照度計及び紫外放射照度計を用いて,

安全キャビネットの作業台上の照度及び紫外放射照度を測定する。照度が 200 lx 以上で紫外放射照度

が 0.001 mW/cm

2

以上の場合は,照度が 200 lx 未満で紫外放射照度が 0.001 mW/cm

2

未満になるよう,

要因を取り除いてから試験する。

b)

試験片を取り扱う A.3.6 の作業を行う際に,試験片を保管する容器内に漏れる光によって可視光応答

形光触媒作用が働かないことを確実にするため,照度計及び紫外放射照度計を用いて,容器内の照度

及び紫外放射照度を測定する。照度が 10 lx 以上で紫外放射照度が 0.001 mW/cm

2

以上の場合は,照度

が 10 lx 未満で紫外放射照度が 0.001 mW/cm

2

未満になるよう,要因を取り除いてから試験する。

c)

試験片を培養する培養器内に漏れる紫外線によって光触媒作用が働かないことを確実にするため,照

度計及び紫外放射照度計を用いて,培養器内の照度及び紫外放射照度を測定する。照度が 10 lx 以上

で紫外放射照度が 0.001 mW/cm

2

以上の場合は,照度が 10 lx 未満で紫外放射照度が 0.001 mW/cm

2

未満

になるよう,窓を覆い隠すなど,要因を取り除いてから試験する。

A.3.5 

試験片の調製 

試験片の調製は,次による。

a)

可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工平板状製品及び無加工製品の平らな部分を 50±2 mm 角

(厚さ 10 mm 以内)の正方形に切り取り,これを標準の大きさの試験片とする。ただし,製品を 50

±2 mm 角

(厚さ 10 mm 以内)

の正方形に切り取ることが困難又は不可能な場合,

表面積 400∼1 600 mm

2

の密着フィルムをかぶせることが可能な試験片の形状及び大きさであれば,ここに規定する形状及び

大きさ以外の試験片を使用してもよい。

b)

これらの試験片を,無加工試験片は 6 個(3 個は試験菌液接種直後の生菌数測定用に,残りの 3 個は

24 時間培養後の生菌数測定に用いる。),可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工した試験片は 3 個

準備する。

c)

無加工製品から無加工試験片が準備できない場合は,7.2.7 のガラス板を使用してもよい。試験片の調

製に当たっては微生物汚染,製品間の相互汚染及び汚れに十分注意する。可視光応答形ハイブリッド

光触媒抗菌加工した試験片は,製品そのものから採取することが望ましいが,製品の形状から試験片

の調製が困難な場合は,同じ原材料及び加工方法で別途平板状に加工したものから試験片を調製して

もよい。

d)

無加工試験片が所定枚数用意できない場合で,3 個準備できる場合には,24 時間培養後の生菌数測定

用として無加工試験片 3 個を使用し,試験菌液接種直後の生菌数測定用にはガラス板を代用する。3

個準備できない場合は,全てガラス板を使用する。

A.3.6 

試験片の清浄化及び保管 

試験片に紫外線が作用しないようにするため,A.3.4 a)の状態に保った安全キャビネット内で作業する。

a)  A.3.5

の試験片の全面を,エタノールを吸収させた局方ガーゼ又は脱脂綿で軽く 2∼3 回拭いた後,十

分に乾燥する。これらの処理をすることによって,試験片の軟化,表面の塗装の溶解,成分の溶出な

どの変化が起こり,これらが原因で試験結果に影響を及ぼすと判断される場合においては,他の適切

な方法を用いて清浄化するか,又は清浄化せずにそのまま試験に用いる。

b)  a)

の各試験片を試験面を上にして滅菌済みシャーレ内に置く。ただし,直ちに A.3.7 の手順に移らな

い場合には,A.3.7 の作業を始めるまでの間 A.3.4 b)の容器内で保管する。試験面は可視光応答形ハイ

ブリッド光触媒抗菌加工が施されている製品の表面とし,内部まで可視光応答形ハイブリッド光触媒


16

R 1752

:2013

抗菌加工されている製品であっても,切断面は試験面としない。

A.3.7 

試験菌液の調製 

A.3.3

で前培養した試験菌の菌体 1 白金耳量を,少量の 7.4.1 の 1/500 NB に均一に分散させ,顕微鏡によ

る直接観察又はその他の適切な方法によって菌数を推定する。この菌液を 1/500 NB を用いて適宜希釈し,

菌数が 2.5×10

5

∼10×10

5

個/ml となるように調製し,これを試験菌液とする。試験菌液をすぐに使用しな

い場合は氷冷(0  ℃)保存し,保存 2 時間以内に使用する。

A.3.8 

試験菌液の接種 

試験片に紫外線が作用しないようにするため,A.3.4  a)の状態に保った安全キャビネット内で作業する。

この際,試験片に光が当たる時間は 10 分以内とし,直ちに作業に移れない場合は,試験片に光が当たらな

いよう 7.2.22 の暗箱等を使って,光を遮る。

a)  A.3.7

の試験菌液をピペットで正確に 0.4 ml 採取し,これをシャーレ内の各試験片に滴下する。標準

の大きさ以外の試験片の接種菌液量は,被覆した密着フィルムの面積比で案分する。また,標準の大

きさの試験片であっても,規定に基づく菌液量を接種したとき,陶磁器,タイル,ホーロー,ガラス

などのぬれ性が極めてよい試験片では,僅かな傾斜で密着フィルムが移動したり,密着フィルムの端

から菌液が漏れ出す場合がある。このような場合は,接種菌液の液量を規定量の 1/4 を限度に減じて

もよい。ただし,試験片に接種する菌数は接種菌液量を少なくした場合においても,標準の大きさの

試験片の場合と同様に 1 試験片当たり 1.0×10

5

∼4.0×10

5

個(6.2×10

3

∼2.5×10

4

個/cm

2

)とする。

b)

滴下した試験菌液の上に 7.2.11 の密着フィルムをかぶせ,菌液が密着フィルムの端からこぼれないよ

うに注意しながら,試験菌液が密着フィルム全体に行きわたるように軽く押さえつけた後,シャーレ

の蓋をする(

図 A.1 参照)。密着フィルムの大きさは,40±2 mm 角の正方形を標準とする。試験片が

標準の大きさ以外の場合は,密着フィルムが試験片より 2.5∼5.0 mm 以内となるように大きさを調整

する。ただし,密着フィルムの面積は 800 mm

2

より小さくしてはならない。

注記  例えば,試験片の大きさが標準の 3/4 の大きさの場合には,1 試験片当たり 7.5×10

4

∼3.0×

10

5

個の試験菌液を接種する。この際,ぬれ性がよく,標準の大きさの試験片で 1 試験片当た

り 0.15 ml 接種する場合で想定すると,試験片の大きさが標準の 3/4 の大きさの場合には,6.7

×10

5

∼2.6×10

6

  個/ml となるように試験菌液を調製し,試験片には 0.113 ml 接種する。

c)

直ちに b)のシャーレを相対湿度 90 %以上になるように調整した蓋の付いた容器に入れる。


17

R 1752

:2013

単位  mm

図 A.1−試験片の組立

A.3.9 

試験菌液を接種した試験片の培養 

試験菌液を接種した試験片(無加工試験片 3 個及び可視光応答形ハイブリッド光触媒抗菌加工した試験

片 3 個)を入れたシャーレが入った容器を直ちに A.3.4  c)の培養器に入れ,温度 35±1  ℃で 24±1 時間培

養する。

A.3.10 

接種した試験菌の洗い出し 

A.3.10.1 

試験菌液接種直後の試験片 

A.3.8

の試験菌液を接種した直後の無加工試験片 3 個について,密着フィルム及び試験片をそれぞれ菌液

がこぼれないように注意しながらそれぞれ別のシャーレに置く。シャーレ内に 7.4.4 の SCDLP 培地 10 ml

を加え,ピペットで無加工試験片上の試験菌を最低 4 回洗い出し,菌液を完全に回収する。この洗い出し

液は,速やかに生菌数測定に供する。また,試験菌の洗い出しについては,この方法と同等又はそれ以上

の回収率が認められる方法であれば他の方法を用いてもよい。試験片の大きさ又は特性上,SCDLP 培地

10 ml で洗い出しが困難な場合は,液量を増やしてもよい。

なお,試験片に紫外線が作用しないようにするため,SCDLP 培地を加えるまでは,A.3.4  a)の状態に保

った安全キャビネット内で作業する。この際,SCDLP 培地を加えるまでに試験片に光が当たる時間は 10

分以内とし,直ちに作業に移れない場合は,試験片に光が当たらないよう 7.2.22 の暗箱等を使って光を遮

る。

A.3.10.2 

培養後の試験片 

A.3.9

の培養後の試験片について,A.3.10.1 と同様に試験菌を洗い出す。この洗い出し液は,速やかに生

菌数測定に供する。また,試験菌の洗い出しについては,この方法と同等又はそれ以上の回収率が認めら

れる方法であれば他の方法を用いてもよい。

なお,試験片に紫外線が作用しないようにするため,SCDLP 培地を加えるまでは,A.3.4  a)の状態に保

った安全キャビネット内で作業する。この際,SCDLP 培地を加えるまでに試験片に光が当たる時間は 10

分以内とし,直ちに作業に移れない場合は,試験片に光が当たらないよう 7.2.22 の暗箱等を使って光を遮


18

R 1752

:2013

る。

A.3.11 

寒天平板培養法による生菌数の測定 

A.3.10.1

又は A.3.10.2 の洗い出し液を滅菌したピペットで 1 ml 採り,

7.4.7

のりん酸緩衝生理食塩水 9.0 ml

の入った試験管に加え,試験管ミキサーなどで十分にかくはん(撹拌)する。さらに,この試験管から 1 ml

を新しいピペットで採り,りん酸緩衝生理食塩水 9.0 ml が入った別の試験管に加え,十分にかくはん(撹

拌)する。この操作を順次繰り返して,10 倍希釈系列希釈液を作製し,各希釈系列の試験管からそれぞれ

別のシャーレ 2 枚に新しいピペットで 1 ml 採り,45∼48  ℃に保温した 7.4.8 の標準寒天培地 15∼20 ml を

加え,蓋をして室温で放置し,培地が固まった後,シャーレを倒置し,培養器中で 35±1  ℃で 40∼48 時

間培養する。培養後,30∼300 個の集落が現れた希釈系列のシャーレのコロニー数を測定する。洗い出し

液 1 ml を用いたシャーレの集落数が 30 個未満の場合は,測定した集落数をコロニー数とする。また,洗

い出し液 1 ml を用いたシャーレから生残菌が認められない場合は“<1”と表示する。

注記  ここで規定する以外の集落数の採用方法については,日本薬学会編  衛生試験法・注解(2010)

1.2 微生物試験法 1.2.1.1 細菌一般試験法 3)菌数測定(1)混釈平板培養法又は厚生労働省監修  食

品衛生検査指針微生物編(2004)  第 2 章細菌 2 汚染指標菌 1.細菌数を参考にするとよい。

参考文献  JIS Z 9110  照明基準総則

JIS Z 9125

  屋内作業場の照明基準

抗菌加工製品ガイドライン

病原体等安全管理規程

住宅照明設計技術指針

オフィス照明設計技術指針

衛生試験法

食品衛生検査指針