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K 0450-10-10

:2006

(1) 

まえがき

この規格は,工業標準化法第 14 条によって準用する第 12 条第 1 項の規定に基づき,社団法人日本工業

用水協会(JIWA)/財団法人日本規格協会(JSA)から,工業標準原案を具して日本工業規格を改正すべきとの

申出があり,日本工業標準調査会の審議を経て,経済産業大臣が改正した日本工業規格である。

これによって,JIS K 0450-10-10:2000 は改正され,この規格に置き換えられる。

この規格の一部が,技術的性質をもつ特許権,出願公開後の特許出願,実用新案権,又は出願公開後の

実用新案登録出願に抵触する可能性があることに注意を喚起する。経済産業大臣及び日本工業標準調査会

は,このような技術的性質をもつ特許権,出願公開後の特許出願,実用新案権,又は出願公開後の実用新

案登録出願にかかわる確認について,責任はもたない。

JIS K 0450-10-10

には,次に示す附属書がある。

附属書 1(規定)試験に使用する水の質の確認方法

附属書 2(規定)感度係数を用いる濃度の算出方法

附属書 3(参考)装置の定量範囲の下限値を確認する場合の方法

JIS K 0450

の規格群には,次に示す部編成がある。

JIS K 0450-10-10

工業用水・工場排水中のビスフェノール A 試験方法

JIS K 0450-20-10

工業用水・工場排水中のアルキルフェノール類試験方法

JIS K 0450-30-10

工業用水・工場排水中のフタル酸エステル類試験方法

JIS K 0450-40-10

用水・排水中のアジピン酸ビス(2-エチルヘキシル)試験方法

JIS K 0450-50-10

用水・排水中のベンゾフェノン試験方法


K 0450-10-10

:2006

(2) 

目  次

ページ

1.

  適用範囲

1

2.

  引用規格

1

3.

  共通事項

1

4.

  試料

2

4.1

  試料の採取 

2

4.2

  試料の取扱い 

2

5.

  試料の前処理 

2

5.1

  溶媒抽出法 

2

5.2

  固相抽出法 

4

5.3

  クロマトグラフ分離及び誘導体化 

6

6.

  ガスクロマトグラフ質量分析法

8

6.1

  試薬

8

6.2

  器具及び装置 

8

6.3

  操作

9

6.4

  検量線

10

7.

  結果の表示 

11

附属書 1(規定)試験に使用する水の質の確認方法 

13

附属書 2(規定)感度係数を用いる濃度の算出方法 

14

附属書 3(参考)装置の定量範囲の下限値を確認する場合の方法 

15


     

日本工業規格

JIS

 K

0450-10-10

:2006

工業用水・工場排水中のビスフェノール A 試験方法

Testing method for bisphenol A in industrial water and waste water

1. 

適用範囲  この規格は,工業用水及び工場排水中の  4,4′-(1-メチルエチリデン)ビスフェノール(ビ

スフェノール A)(C

15

H

16

O

2

)(CAS No.80-05-7)

の試験方法について規定する。

2. 

引用規格  付表 に示す規格は,この規格に引用されることによって,この規格の規定の一部を構成

する。これらの引用規格は,その最新版(追補を含む。

)を適用する。

3. 

共通事項  共通事項は,次による。

a) 

通則  化学分析に共通する一般事項は,JIS K 0050 による。

b) 

定義  この規格で用いる主な用語の定義は,JIS K 0101JIS K 0102JIS K 0211 又は JIS K 0215 

よる。

c) 

ガスクロマトグラフ質量分析法  ガスクロマトグラフ質量分析法に共通する一般事項は,JIS K 0123

による。

d) 

化合物の名称  化合物の名称は,社団法人日本化学会が定めた化合物命名法[国際純正及び応用化学

連合(IUPAC)の有機化学命名法に基づく。

]によるものを用い,その末尾に慣用名を括弧で記載してあ

る。

e) 

水  この規格で用いる水は,JIS K 0557 に規定する A1∼A4 の水とする。

f) 

試薬

1) 

試薬は,日本工業規格(以下,JIS という。

)に規定されているもので試験に支障のないものを用い

る。JIS に規定されていないものは,試験に支障のないものを用いる。

2) 

標準液の濃度は,mg/ml,µg/ml 又は ng/ml で表す。

3)  A

と B の混合溶液濃度は,C(a+b)で表す。この表し方は,A と B を ml と ml の割合で混合した

ことを示す。

4) 

標準液の名称の後に括弧で示す濃度は,正確な濃度であることを意味する。

5) 

試薬類の名称は,国際純正及び応用化学連合(IUPAC)の無機化学命名法及び有機化学命名法を基に

して社団法人日本化学会が定めた化合物命名法及び JIS 試薬の名称とできるだけ整合させている。

6) 

標準液の調製に使用する試薬は,可能な限りトレーサビリティが確保された標準物質又は認証標準

物質を使用する。入手できない場合は,純度と不確かさが明らかなものを用いる。この規格では,

“標準品”と記述してある。それらの中には類似した化合物が不純物として含まれることがあるの

で,試験に支障のないものを使用する。

7) 

試薬類及び廃液類などによる室内汚染,人体への吸入及び付着に注意する。また,その取扱いにつ


2

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いては,関係法令,規則などに従い,十分に注意する。

g) 

ガラス器具類  ガラス器具類についての共通事項は,次による。

1) 

ガラス器具類は,

特に断らない限り JIS R 3503 及び JIS R 3505 に規定するものを使用する。

ただし,

分液漏斗などのコック部には,四ふっ化エチレン樹脂製のものを用いてもよい。また,加熱操作を

伴う場合には,JIS R 3503 に規定するほうけい酸ガラス-1 を用いる。

デシケーターに用いる乾燥剤は,特に断らない限りシリカゲル(

1

)

とする。

(

1

) JIS 

0701

に規定する包装用シリカゲル乾燥剤 A 形 1 種を用いる。

2) 

試験に用いるガラス器具類は,使用前に 5.1.1a)の水で洗浄した後,更に,アセトン(JIS K 8040 

規定する濃縮 300 以上の品質のもの。

)で洗浄し,放置してアセトンを揮散させた後,約 200  ℃で

約 2 時間加熱し,汚染のないところで放冷する。

h) 

検量線  検量線の作成に当たっては,試験方法に示される定量範囲内を 4∼6 段階に分け,ガスクロマ

トグラフ質量分析計へ導入するビスフェノール A の量がその量に一致するように標準液をとり,定量

範囲内について作成する。

4. 

試料

4.1 

試料の採取

4.1.1 

試料容器  試料容器は,共栓ガラス瓶 1 000 ml(

2

)

を用いる。

(

2

共栓の代わりにねじぶた(四ふっ化エチレン樹脂製のパッキン付き)を用いてもよい。

4.1.2 

採取操作  採取操作は,次による。

a) 

表層水の採取  JIS K 0094 の 4.1.1(試料容器による採取)又は 4.1.2(バケツ類による採取)による。

b) 

各深度の水の採取  JIS K 0094 の 4.1.4(バンドーン採水器による採取)による。

c) 

配管装置からの採取  JIS K 0094 の 4.3(採取弁を用いる採取)による。

4.2 

試料の取扱い  試験は試料採取後,直ちに行う。直ちに行えない場合には,0∼10  ℃の暗所に保存

し,できるだけ早く試験する。冷所に保存する場合には,凍結させないようにする。

5. 

試料の前処理  試料の前処理には,溶媒抽出法又は固相抽出法を適用し,対象成分を濃縮した後,カ

ラムクロマトグラフ分離及び誘導体化を行う。固相抽出法は,懸濁物を含む試料では,抽出に影響を及ぼ

すことがあるので注意する。

なお,試料中に懸濁物が多量に含まれる場合には,5.1.3 

備考の操作を行う。

5.1 

溶媒抽出法  試料に塩酸を加えて pH を約 3 に調節し,塩化ナトリウムを添加後,内標準物質として

ビスフェノール A-d

16

を加え,ジクロロメタンを用いて抽出後,抽出液を,脱水,濃縮する(

3

)

(

3

) 3. 

f) 

7)

による。

5.1.1 

試薬  試薬は,次による。

a) 

水  3.e)の A4(又は A3)を用いる(

4

)

。試薬の調製,操作,空試験に用いる。

(

4

精製直後のものを用いる。必要な場合には,使用前に

附属書 の操作を行い,ビスフェノール

A

の保持時間に相当する位置にピークのないことを確認する。さらに,精製が必要な場合には,

JIS K 0557

の 4.

備考 6.による。又は A4 又は A3 の水を活性炭などで処理する。

b) 

塩酸(1 mol/L)  JIS K 8180 に規定する塩酸を用いて調製する。

c) 

塩化ナトリウム  JIS K 8150 に規定する塩化ナトリウムを約 600  ℃で約 60 分間加熱した後,デシケ

ーター中で放冷する。


3

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d) 

硫酸ナトリウム  JIS K 8987 に規定する硫酸ナトリウムを約 600  ℃で約 60 分間加熱した後,デシケ

ーター中で放冷する。

e) 

アセトン  JIS K 8040 に規定する濃縮 300 以上の品質のもの(

5

)

(

5

使用前に,30 ml を用いて 5.1.3 の d)及び e)に準じた操作を行い,得られた濃縮液を用いて 5.3.3 

の g)及び h)の誘導体化の操作を行う。この溶液を用いて 6.3 c)の操作を行い,ビスフェノール A

の保持時間に相当する位置にピークのないことを確認する。

f) 

ジクロロメタン  JIS K 8117 に規定する濃縮 300 以上の品質のもの(

6

)

(

6

使用前に,120 ml を用いて 5.1.3 の d)及び e)に準じた操作を行い,得られた濃縮液を用いて 5.3.3 

の g)及び h)の誘導体化の操作を行う。この溶液を用いて 6.3 c)の操作を行い,ビスフェノール A

の保持時間に相当する位置にピークのないことを確認する。

g) 

ビスフェノール A-d

16

内標準液(10 µg/ml-アセトン)  ビスフェノール A-d

16

(C

15

H

16

O

2

-d

16

)

の標準品

0.100 g

を全量フラスコ 100 ml にとり,アセトンを標線まで加える。この溶液 1 ml を全量フラスコ 100

ml

にとり,アセトンを標線まで加える(

7

)

(

7

)  5

℃以下の暗所に保存する。

h) 

ビスフェノール A-d

16

内標準液(1 µg/ml-アセトン)  ビスフェノール A-d

16

内標準液(10

µg/ml-アセ

トン)1 ml を全量フラスコ 10 ml にとり,アセトンを標線まで加える(

7

)

i) 

窒素  JIS K 1107 に規定する高純度窒素 2 級

備考  ビスフェノール A 重水素化物には,重水素の数が 16 のものと,6,8 のものがあり,いずれを

使用してもよい。ただし,重水素の数が 16 のものは,誘導体化したときヒドロキシル基の重水

素は TMS との置換によってなくなる。

5.1.2 

器具  器具は,次による。

a) 

分液漏斗  1 000∼2 000 ml。

b) 

目盛付き共栓試験管  10∼20 ml。0.5 ml 及び 1 ml に目盛のあるもの。

c) 

共通すり合わせ三角フラスコ  100∼500 ml のもの。

d) 

マイクロシリンジ  100∼200

µl のもの。

e) 

濃縮器  ロータリーエバポレーター又はクデルナ−ダニッシュ濃縮器(

8

)

(

8

毛細管を付けないもの。

f) 

濃縮器用フラスコ  ロータリーエバポレーターを用いる場合は,なす形フラスコ。クデルナ−ダニッ

シュ濃縮器を用いる場合は,濃縮管付き濃縮フラスコ。100∼500 ml の共通すり合わせで濃縮器に接

続できるもの。

g) 

振とう器

5.1.3 

操作  操作は,次による。

a) 4.1.2

で採取した試料(

9

)

の適量(例えば,1 L)を分液漏斗にとり,塩酸(1 mol/L)を加えて,pH を約 3

に調節し,液量 1 L について塩化ナトリウム 30 g を加える(

10

)

。続いてビスフェノール A-d

16

内標準液

(1

µg/ml-アセトン)100 µl をマイクロシリンジを用いて添加し,液量 1 L についてジクロロメタン 50

ml

を加え,振とう器を用いて約 10 分間振り混ぜ,放置する。

(

9

試料中に懸濁物が多量に含まれる場合には,5.1.3 

備考の操作を行う。

(

10

海水の場合は,塩化ナトリウムの添加は行わない。

b) 

ジクロロメタン層を共通すり合わせ三角フラスコに移し入れる。分液漏斗の水層に液量 1 L について

ジクロロメタン 50 ml を加え,振とう器を用いて約 10 分間振り混ぜ,放置する。ジクロロメタン層を


4

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先の共通すり合わせ三角フラスコに合わせる。

c) 

共通すり合わせ三角フラスコ中のジクロロメタン溶液 100 ml について硫酸ナトリウム 20∼30 g(

11

)

加え,軽く振り混ぜ,約 10 分間放置して脱水(

12

)

する。ろ紙 5 種 A(又は 5 種 B)(

13

)

を用いてろ過し,

ろ液を濃縮器用フラスコに受ける。ジクロロメタン溶液を入れた共通すり合わせ三角フラスコは,少

量のジクロロメタンで 2 回又は 3 回洗浄する。さらに,その洗液で,先のろ紙及びろ紙上の硫酸ナト

リウムも洗浄し,洗液を濃縮器用フラスコに合わせる。

(

11

エマルションが生じた場合には,更に過剰に加える必要がある。

(

12

このほかに,ジクロロメタン溶液を−20  ℃の暗所に保存し,水分を凍結させて分離する方法も

ある。濃縮操作を当日行わない場合に用いるとよい。

(

13

ろ紙は,使用時にジクロロメタンで洗浄する。

d) 

濃縮器を用いて,約 40  ℃の水浴中で加熱(

14

)

しながら,ジクロロメタン溶液を約 5 ml になるまで濃縮

する。

(

14

ロータリーエバポレーターを用いた場合は,約 40  ℃の水浴中で加熱しながら減圧濃縮する。

乾固しないように注意する。クデルナ−ダニッシュ濃縮器を用いる場合は,減圧方式ではなく,

大気圧下で 75  ℃以下で加熱して濃縮する。濃縮終了後,スニーダーカラムを濃縮部に付けた

まま装置から取り外し,スニーダーカラムの上部から少量のジクロロメタンを加えて洗浄し,

スニーダーカラムを付けたまま放冷する。

e) 

この濃縮液を目盛付き共栓試験管に移す。濃縮に用いた濃縮器用フラスコをジクロロメタン 2∼3 ml

で洗浄し,その洗液も目盛付き共栓試験管に合わせる。これを約 40  ℃の水浴中で加熱しながら,溶

液に窒素を緩やかに吹き付け,約 0.5 ml になるまで濃縮する(

15

) (

16

)(

17

)

(

15

直ちに 6.3 の操作を行わない場合には,この濃縮液を−20  ℃の暗所に保存する。

  (

16

カラムクロマトグラフ分離を省略する場合は,5.3.3f)の操作に移る。

(

17

窒素を吹き付ける操作では,濃縮液が飛散しないように注意する。濃縮液の表面が動いている

のがようやく見える程度に窒素の流量を調節する。また,乾固させると窒素の吹き付けによっ

て対象物質が揮散することがあるので注意する。

f) 

空試験用として試料に代え,試料と同量の水を分液漏斗にとり,a)e)の操作を行う。

備考  試料中に懸濁物が多量に含まれる場合には,次の操作を行い,続いて 5.1.3 a)の塩化ナトリウム

を添加する以降の操作を行う。

1) 4.1.2

で採取した試料をよく振り混ぜ,懸濁物を均一に分散させた後,その適量をとり,ア

セトンで洗浄した孔径 1 µm のガラス繊維ろ紙を用いて吸引ろ過[JIS K 0102 の 14.1(懸濁

物質)のろ過器(分離形)を用いる。

]する。

2) 

ガラス繊維ろ紙上の懸濁物は,ガラス繊維ろ紙ごとビーカーに移し,アセトン約 10 ml を

加え,溶出操作を超音波洗浄器を用いて 2 回又は 3 回行う。溶出液を合わせ,濃縮器を用

いて減圧濃縮を行い,約 5 ml になるまで濃縮する。

3) 1)

のろ液及び 2)の濃縮液を分液漏斗にとり,塩酸(1 mol/L)を加えて pH を約 3 に調節する。

続いて,5.1.3 a)の塩化ナトリウムを添加する以降の操作を行う。

5.2 

固相抽出法  試料に塩酸を加えて pH を約 3.5 に調節し,内標準物質としてビスフェノール A-d

16

加え,固相カラム又は固相ディスクを用い,加圧法(

18

)

又は減圧法(

19

)

で通水して対象物質を吸着させた後,

ジクロロメタンで溶出し,約 40  ℃で,濃縮する(

3

)

(

18

固相カラムに対して試料を加圧状態で送り込む方法をいう。


5

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装置は,調節部及びポンプ部から成り,調節部は,試料を流す時間及び通水流量を制御する。

ポンプ部は,シリンジを用いる方式とペリスタルティックポンプを用いる方式がある。シリ

ンジの場合は,チューブは四ふっ化エチレン樹脂製のものを使用する。ペリスタルティックポ

ンプの場合は,使用する溶媒に適したポンプ用チューブを用いる。

(

19

固相カラムの底部側を減圧状態として試料を送り込む方法をいう。

装置は,吸引用配管部と真空ポンプ又はアスピレーターから成る。減圧法は,固相の通液抵

抗のばらつき,試料中の懸濁物などによって流量を一定に保つことが困難であるが,簡易な装

置で一度に多数の試料を処理できるなど有効な場合もある。

5.2.1 

試薬  試薬は,次による。

a) 

水  5.1.1 a)による。

b) 

塩酸(1 mol/L)  5.1.1 b)による。

c) 

アセトン  5.1.1 e)による。

d) 

ジクロロメタン  5.1.1 f)による。

e) 

アセトン-ジクロロメタン溶離液(16)

f) 

ビスフェノール A-d

16

内標準液(

µg/ml-アセトン)  5.1.1 h)による。

g) 

窒素  5.1.1 i)による。

5.2.2 

器具  器具は,次による。

a) 

目盛付き共栓試験管  5.1.2 b)による。

b) 

マイクロシリンジ  5.1.2 d)による。

c) 

固相カラム  内径 10 mm,長さ 30∼50 mm のカートリッジ。カラム充てん剤は,シルカゲルに逆相系

を化学結合したもの又は合成吸着剤を充てんしたもの。合成吸着剤は,多孔性のスチレンジビニルベ

ンゼン共重合体又はこれと同等の性能をもつもの。使用前にアセトン約 10 ml 及び水約 10 ml を通し

て洗浄しておく。

備考  固相は,市販品にはディスク形のものもあり,これを用いてもよい。その場合,試料の流量及

び溶出溶媒の必要量についてはあらかじめ確認しておく。

参考  固相カラム又は固相ディスクには,市販品として次のようなものがある。

Sep-Pak PS-2

,Oasis

TM

HLB

,InertSep RP-1,abselut NEXUS などのカートリッジ形,エムポア

ディスク SDB-RPS など。

5.2.3 

操作  操作は,次による。

a) 4.1.2

で採取した試料の適量(例えば,1 L)(

20

)

をとり,塩酸(1 mol/L)を加えて pH を約 3.5 に調節し,

ビスフェノール A-d

16

内標準液(1

µg/ml-アセトン)100 µl をマイクロシリンジを用いて添加し,固相

カラム(

21

)

に加圧法又は減圧法によって,流量 10∼20 ml/min(

22

)

で通水する。

(

20

懸濁物の多い試料は,5.1.3 

備考 1)及び 2)の操作(濃縮は行わない。)を行い,この溶出液を

c)

の溶出液に合わせる。

(

21

処理した固相カラムについて回収率などをあらかじめ確認してから使用することが望ましい。

(

22

試料の流量が大きいと保持率が小さくなることがある。流量は,20 ml/min 以上とはしない。固

相カラムへの対象物質の吸着帯の幅は,1 ml/min 程度で最小となるが,10∼20 ml/min でも十分

な再現性と回収率が得られ,処理時間の短縮といった利点もある。しかし,有機物の濃度が高

い試料の場合は,流量を小さく(5 ml/min 以下)すると,再現性と回収率の向上につながる。

また,流量は一定に保つ。


6

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b) 

固相カラムに水 10 ml を流して固相カラムを洗浄した後,約 30 分間吸引し,水分を分離除去する。

c) 

固相カラムの上端からジクロロメタン 9 ml 又はアセトン-ジクロロメタン溶離液(1+6)5 ml(

23

)

を緩や

かに通し(

24

)

てビスフェノール A を溶出させ,目盛付き共栓試験管に受ける。

(

23

使用する量は,あらかじめビスフェノール A を溶出するのに十分な量であることを確認してお

く。

(

24

溶出流量は,カラムからの溶出液の液滴が連続しない程度とする。

d) 

目盛付き共栓試験管を,約 40  ℃の水浴中で加熱しながら,溶出液に窒素を緩やかに吹き付け,ジク

ロロメタン又はアセトン-ジクロロメタン溶離液(1+6)が約 0.5 ml になるまで濃縮する(

15

)(

16

)(

17

)

e) 

空試験用として試料に代え,試料と同量の水をとり,a)d)の操作を行う。

5.3 

クロマトグラフ分離及び誘導体化  カラム 5.1 又は 5.2 を行った後,カラム充てん剤にシリカゲルを

用いるカラムクロマトグラフ分離操作を行い,ピレン-d

10

を添加後,誘導体化の操作を行う。

妨害物質が存在しない場合は,5.3.3 a)e)の操作(カラムクロマトグラフ分離操作)を省略することが

できる。その場合には,5.3.3 f)以降の操作を行う。

5.3.1 

試薬  試薬は,次による。

a) 

水  5.1.1 a)による。

b) 

硫酸ナトリウム  5.1.1 d)による。

c) 

アセトン  5.1.1 e)による。

d) 

ジクロロメタン  5.1.1 f)による。

e) 

ヘキサン  JIS K 8825 に規定する濃縮 300 以上の品質のもの(

6

)

f) 

アセトン-ヘキサン溶離液(14)

g) 

ピレン-d

10

内標準液(1 mg/ml)(

25

)

  ピレン-d

10

(C

16

H

10

-d

10

)

の標準品 0.100 g をとり,あらかじめ,ヘキサ

ン 2∼3 ml を入れた全量フラスコ 100 ml に移し,ヘキサンを標線まで加える(

7

)

(

25

ピレン-d

10

内標準液は,ビスフェノール A-d

16

の回収率測定の場合の内標準として用いる。

h) 

ピレン-d

10

内標準液(100 µg/ml)  ピレン-d

10

内標準液(1 mg/ml)1 ml をとり,あらかじめ,ヘキサン 2∼3

ml

を入れた全量フラスコ 10 ml に移し,ヘキサンを標線まで加える(

7

)

i) 

ピレン-d

10

内標準液(1 µg/ml)  ピレン-d

10

内標準液(100

µg/ml)1 ml をとり,あらかじめ,ヘキサン 2∼3

ml

を入れた全量フラスコ 100 ml に移し,ヘキサンを標線まで加える。

j) 

N,O-

ビス(トリメチルシリル)トリフルオロアセトアミド(BSTFA)  ガスクロマトグラフ用を用いる。

k) 

窒素  5.1.1 i)による。

5.3.2 

器具  器具は,次による。

a) 

目盛付き共栓試験管  5.1.2 b)による。

b) 

濃縮器  5.1.2 e)による。

c) 

濃縮器用フラスコ  5.1.2 f)による。

d) 

カラムクロマトグラフ管  カラムクロマトグラフ管は,次による。

1) 

カラム用管  内径約 1 cm,長さ約 30 cm のコック付きガラス管。

2) 

カラム充てん剤  カラムクロマトグラフ用のシリカゲル(粒径 150∼250

µm)を約 130  ℃で 15 時

間以上加熱した後,デシケーター中で放冷する。その 95 g を共通すり合わせ三角フラスコにとり,

かき混ぜながら,水 5 ml を滴加する。軽く栓をし,発熱が終了するまで静かに混合する。さらに,

振とう器で約 30 分間振り混ぜる。3)でカラムクロマトグラフ管として調製したものについて,対象

物質の保持時間にピークの生じないことを確認する(

26

)


7

K 0450-10-10

:2006

     

(

26

処理したシリカゲルの 5 g を,3)によってカラムクロマトグラフ管とし,5.3.3 c)h)に準じた操

作を行い[ただし,ピレン-d

10

内標準液(1 µg/ml)の添加は行わない。

,その濃縮液 1 µl をマイク

ロシリンジでとり,6.3 c)によってビスフェノール A の保持時間に相当する位置にピークのない

ことを確認する。

3) 

カラムクロマトグラフ管の作り方  カラム用管の底部に JIS K 8251 に規定するガラスウール(あら

かじめヘキサンで洗浄したもの。

)を詰め,少量のヘキサンを加えてガラスウール間の気泡を除去す

る。続いて,カラム充てん剤約 5 g をビーカーにとり,ヘキサンを加えてスラリー状にし,これを

気泡が入らないようにカラム用管に流し込み(

27

)

,その上部に硫酸ナトリウムを約 2 cm になるよう

に積層した後,コックを操作し,ヘキサンが硫酸ナトリウム層よりわずかに上部になるようにヘキ

サンを流し出す(

28

)

(

27

カラム用管にカラム充てん剤を均一に充てんするため,流し込んだ後,カラム用管に縦横の振

動を与えるとよい。

(

28

市販のシリカゲルカートリッジを用いてもよい。ただし,使用前に回収率などをあらかじめ確

認しておく。

e) 

円筒形滴下漏斗  200 ml。カラムクロマトグラフ用。

f) 

振とう器

5.3.3 

操作  操作は,次による。

a) 5.1.3 

e)

の濃縮液の全量又は 5.2.3 d)の濃縮液の全量をカラムクロマトグラフ管の上部から流し込み,コ

ックを操作して液面を硫酸ナトリウムの層よりわずかに上部になるようにする。濃縮液が入っていた

目盛付き共栓試験管の内壁をジクロロメタン 0.5∼1 ml で洗い,洗液はカラムクロマトグラフ管に流

し込む。

b) 

カラムクロマトグラフ管の上部に円筒形滴下漏斗を装着し,ヘキサン 100 ml を入れ,約 1 ml/min で流

下して対象物質を吸着させる。ヘキサンが硫酸ナトリウム層のわずか上部にある状態でコックを閉め,

流出液は捨てる。

c) 

引き続いてカラムクロマトグラフ管の上部の円筒形滴下漏斗から,アセトン-ヘキサン溶離液(1+4)150

ml

を約 1 ml/min で流下し,ビスフェノール A を溶出させ(

29

)

,溶出液 150 ml を濃縮器用フラスコに受

ける。

(

29

) 5.3.3

備考の操作によってあらかじめ溶出パターン及び回収率を確認しておくとよい。

d) 

濃縮器を用いて,約 40  ℃の水浴中で加熱しながら,溶出液を 2∼5 ml になるまで濃縮する(

15

)

e) 

ジクロロメタン 15 ml を加え,この溶液を再び 2∼5 ml になるまで濃縮(

15

)

し,濃縮器用フラスコを取

り外し,濃縮液を目盛付き共栓試験管に移す。濃縮器用フラスコをジクロロメタン 1∼2 ml で洗浄し,

この洗液も目盛付き共栓試験管に移す。

f) 

ピレン-d

10

内標準液(1

µg/ml)1 ml を添加し,目盛付き共栓試験管を,約 40  ℃の水浴中で加熱しながら,

濃縮液に窒素を緩やかに吹き付け,約 0.5 ml になるまで濃縮する(

17

)

g) 

この濃縮液に N,O-ビス(トリメチルシリル)トリフルオロアセトアミド(BSTFA)200

µl を加え,直ち

に栓をして振り混ぜた後,室温で約 1 時間放置して誘導体化する。

h) 

次いで,窒素を緩やかに吹き付け,0.2∼0.3 ml になるまで濃縮し(

17

)

,ジクロロメタンを加えて 1 ml

の一定量とし,これを測定用溶液とする。

i) 

空試験用として,5.1.3 f)又は 5.2.3 e)の濃縮液の全量を用いて a)h)の操作を行い,空試験用溶液とす

る。


8

K 0450-10-10

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備考  溶出パターン及び回収率の確認は,次の操作を行う。この操作によってカラムクロマトグラフ

操作に必要なヘキサン及びアセトン-ヘキサン溶離液(1+4)の量を確認しておく。

1) 

ヘキサン約 1 ml を目盛付き共栓試験管にとり,6.1 d)のビスフェノール A 標準液(1

µg/ml)100 µl

をマイクロシリンジで加え,振り混ぜた後,全量をカラムクロマトグラフ管の

上部から流し込む。

2) 

コックを操作し,液面が硫酸ナトリウム層よりわずかに上部になるようにする。

3) 

続いて b)の操作を行い,最初から流出する溶液約 50 ml を 1 画分として別々の目盛付き共

栓試験管にとる。

4) 

さらに,c)の操作を行い,最初から流出する溶液約 30 ml を 1 画分として別々の目盛付き

共栓試験管にとる。

5) 

それぞれの目盛付き共栓試験管に 6.1 g)のビスフェノール A-d

16

内標準液(1 µg/ml-ジクロ

ロメタン)100 µl をマイクロシリンジで加え,振り混ぜた後,約 40  ℃の水浴中で加熱し

ながら,窒素を緩やかに吹き付け,約 1 ml になるまで濃縮する。

6) 

各濃縮液について 5.3.3 f)h)

6.3 c)

e)及び g)によって溶出パターン及び回収率を求める。

6. 

ガスクロマトグラフ質量分析法  測定用溶液の一定量をガスクロマトグラフ質量分析計に導入し,ビ

スフェノール A-d

16

を内標準物質として選択イオン検出法(SIM 法)又は全イオン検出法(TIM 法)によ

ってビスフェノール A を定量する。

定量範囲:C

15

H

16

O

2

 10

∼300 pg  繰返し分析精度:10∼20 %(いずれも装置,測定条件によって異なる。

(

30

)

(

30

繰返し分析精度は,標準溶液を用い,繰返し試験で求めた変動係数(%)の概略値。

参考  使用する装置の定量範囲の下限値を確認する場合は,附属書 によるとよい。

6.1 

試薬  試薬は,次による。

a) 

ジクロロメタン  5.1.1 f)による。

b) 

ビスフェノール 標準液(1 mg/ml)  ビスフェノール A(C

15

H

16

O

2

)

の標準品 0.100 g を,

全量フラスコ 100

ml

にとり,ジクロロメタンを標線まで加える(

7

)

c) 

ビスフェノール 標準液(10 µg/ml)  ビスフェノール A 標準液(1 mg/ml)1 ml を,全量フラスコ 100 ml

にとり,ジクロロメタンを標線まで加える(

7

)

d) 

ビスフェノール 標準液(1 µg/ml)  ビスフェノール A 標準液(10

µg/ml)1 ml を,全量フラスコ 10 ml

にとり,ジクロロメタンを標線まで加える(

7

)

e) 

ビスフェノール 標準液(100 ng/ml)  ビスフェノール A 標準液(1

µg/ml)1 ml を,全量フラスコ 10 ml

にとり,ジクロロメタンを標線まで加える(

7

)

f) 

ビスフェノール 標準液(10 ng/ml)  ビスフェノール A 標準液(100 ng/ml) 1 ml を,全量フラスコ 10 ml

にとり,ジクロロメタンを標線まで加える(

7

)

g) 

ビスフェノール A-d

16

内標準液(1 µg/ml-ジクロロメタン)  5.1.1 g)及び h)と同じ操作によってジクロ

ロメタンを用いて調製する(

7

)

h) 

窒素  5.1.1 i)による。

6.2 

器具及び装置  器具及び装置は,次による。

a) 

目盛付き共栓試験管  5.1.2 b)による。

b) 

マイクロシリンジ  1∼5

µl 及び 100∼500 µl。又は自動注入装置。


9

K 0450-10-10

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c) 

ガスクロマトグラフ質量分析計(GC/MS)  次の条件を満たすもの(

31

)

(

31

これらの条件は,装置,測定条件によって異なる。

1) 

キャピラリーカラム用管  内径 0.1∼0.5 mm,長さ 5∼100 m のステンレス鋼,石英ガラス又はほう

けい酸ガラス製のもの。

2)

キャピラリーカラム  キャピラリーカラム用管の内壁にメチルシリコーン系固定相液体(

32

)

を厚さ

0.05

∼10

µm で被覆したもの又は同等の分離性能をもつもの。

(

32

メチルシリコーン系固定相液体としては,100 %メチルシリコーン,5 %フェニル-95 %メチルシ

リコーンなど,又はこれと同等の分離性能をもつものを用いる。

参考  この試験に用いるキャピラリーカラムで,メチルシリコーン系固定相液体として 100 %メチル

シリコーンを用いたものが,DB-1,CBP-1,CP-SIL-5CB,Inert Capl,SPB-1,Ultra-1 などの名

称で市販されている。

参考  市販品には,内径 0.53 mm のものもある。

3)

検出器  選択イオン検出法(SIM 法)又は全イオン検出法(TIM 法)が行えるもの。

4)

キャリヤガス  ヘリウム[99.999 9 %(体積百分率)以上]で,線速度は 20∼40 cm/s に調節して

用いる。

5)

試料導入方法及び試料導入部温度  試料導入方法は,スプリットレス注入方式(非分割導入方式)

による。試料導入部温度は,220∼280  ℃。

6)  GC/MS

接続部温度  200∼280  ℃。

7)

イオン源温度  200∼250  ℃。

8)

電子加速電圧  70 V。

9)

昇温プログラム  50∼240  ℃(2∼30  ℃/min の昇温)

6.3 

操作  操作は,次による。

a)

あらかじめガスクロマトグラフ質量分析計に,

ビスフェノール A,

ビスフェノール A-d

16

及びピレン-d

10

の選択イオン(m/z)(

33

)

を設定しておく。

(

33

定量イオン,確認イオン及び保持指標の一例を

表 に示す。

  1  対象物質及び内標準物質の選択イオン(m/z)及び保持指標  (PTRI=

Programmed Temperature Retention Index) 

の一例

選択イオン

化合物名 PTRI

*

定量用

確認用

ビスフェノール A の誘導体化物 2

230

357

372

ビスフェノール A-d

16

の誘導体化物

− 368

**

 386

**

ピレン-d

10

 2

140

212

* PTRI はアルカンを基準物質とし,液相として 5 %フェニル-95 %メチルシ

リコーンを用いたときの値である。

** 

ビスフェノール A-d

16

の値。重水素の数が 6,8 のビスフェノール A の場合

には,トリメチルシリル体の質量スペクトルを測定して,最適の測定イオ
ンを決める。

b)

ビスフェノール A 標準液(10 ng/ml)1 ml を目盛付き共栓試験管にとり,ビスフェノール A-d

16

内標準液

(1

µg/ml-ジクロロメタン)100 µl をマイクロシリンジを用いて添加し,引き続き 5.3.3 f)h)の操作を行

う。

c) b)

で得た溶液 1 µl をマイクロシリンジ(

34

)

でとり,ガスクロマトグラフ質量分析計(

33

)

に導入し,選択


10

K 0450-10-10

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イオン検出法(SIM 法)又は全イオン検出法(TIM 法)によってそのクロマトグラムを記録し,出現

するビスフェノール A,ビスフェノール A-d

16

及びピレン-d

10

のピーク位置と保持時間を確認する。

(

34

) 6.4

の検量線作成時と同じものを用いる。

d) 5.3.3 

h)

で得た測定用溶液 1

µl をマイクロシリンジ(

34

)

でとり,c)と同じ操作を行ってクロマトグラムを

記録し,c)の保持時間と一致していることを確認(

35

)

し,保持時間に相当する位置のピークについて,

指示値(

36

)

を読み取る。

(

35

試料中のビスフェノール A による確認イオンと定量イオンのピーク強度比が標準液中のビスフ

ェノール A によるピークの±20 %以内にあれば,同じ物質が存在しているとみなす。

(

36

ピーク高さ又はピーク面積。

e)

ビスフェノール A による指示値とビスフェノール A-d

16

による指示値との比を求める。また,これと

は別に,ビスフェノール A-d

16

による指示値とピレン-d

10

による指示値との比を求める。

f)

空試験として,5.3.3 i)で得た空試験用溶液を用いて,d)の操作を行い,対象物質の保持時間に相当す

る位置にピーク(

35

)

が検出された場合は,ビスフェノール A による指示値とビスフェノール A-d

16

によ

る指示値との比を求める。

g)

検量線からビスフェノール A の質量とビスフェノール A-d

16

の質量との比(試料中の比 及び空試験

の比 b)を求め,次の式によって試料中のビスフェノール A(C

15

H

16

O

2

)

の濃度(

µg/L)を算出する。

V

n

b

a

X

000

1

)

(

×

×

ここに,

X

:  ビスフェノール A の濃度  (

µg/L)

a

:  検量線から求めたビスフェノール A とビスフェノール A-d

16

との質量比

b

:  空試験から求めたビスフェノール A とビスフェノール A-d

16

との質量比

n

:  試料に添加したビスフェノール A-d

16

(

µg)

V

:  試料(ml)

1 000

:  試料 1 L に換算する係数

h)

試料中のビスフェノール A の濃度を算出するに当たり,試料に添加したビスフェノール A-d

16

の回収

率が 50∼120  %にあることを確認しておく。確認操作は,次による。

1)

検量線の作成において段階的にとった検量線作成用標準液中のビスフェノール A-d

16

の選択イオン

による指示値とピレン-d

10

の選択イオンによる指示値とのそれぞれの比を求め,その平均値を算出

する。

2) e)

で求めた試料中のビスフェノール A-d

16

とピレン-d

10

との指示値の比及び 1)で求めた比の平均値と

の比を求め,その百分率を回収率とする。

6.4 

検量線  検量線は,次による。

a)

ビスフェノール A 標準液(1

µg/ml)0.1∼3 ml を全量フラスコ 10 ml に段階的にとり,それぞれにビスフ

ェノール A-d

16

内標準液(1

µg/ml-ジクロロメタン)1 ml を加え,ジクロロメタンを標線まで加える。

b)

これらの溶液 1 ml を目盛付き共栓試験管にとり,引き続き 5.3.3 f)h)の操作を行う。これらを検量線

作成用標準液とする。

c)

それぞれの一定量[試料と同量(例えば,1

µl)]をマイクロシリンジでとり,6.3 d)の操作を行う。

d)

検量線作成用標準液中のビスフェノール A の質量(M

s

)

とビスフェノール A-d

16

の質量(M

i

)

との比

÷÷ø

ö

ççè

æ

i

s

M

M

を横軸にとり,ビスフェノール A の選択イオン(

33

)

による指示値(A

s

)(

36

)

とビスフェノール A-d

16

の選択


11

K 0450-10-10

:2006

     

イオン(

33

)

による指示値(A

i

)(

36

)

との比

÷÷ø

ö

ççè

æ

i

s

A

A

を縦軸にとって,関係線を作成する。検量線の作成は,試料

測定時に行う。

備考  検量線の作成に代え,感度係数(RF)を求め,これによって検出量を求める方法を附属書 に示

す。

7. 

結果の表示  結果の表示には,用いた試験方法,試料量,濃縮条件(例えば,濃縮量,カラムクロマ

トグラフ分離の有無など)

,ガスクロマトグラフ質量分析計の測定条件[例えば,6.2 c)に掲げる条件にお

いて,いずれかを選択した事項など。

,ガスクロマトグラフへの導入量,対象物質の測定結果,6.3 h)で確

認した回収率などを明記する。


12

K 0450-10-10

:2006

     

付表 1  引用規格

JIS K 0050

  化学分析方法通則

JIS K 0094

  工業用水・工場排水の試料採取方法

JIS K 0101

  工業用水試験方法

JIS K 0102

  工場排水試験方法

JIS K 0123

  ガスクロマトグラフ質量分析通則

JIS K 0211

  分析化学用語(基礎部門)

JIS K 0215

  分析化学用語(分析機器部門)

JIS K 0557

  用水・排水の試験に用いる水

JIS K 1107

  高純度窒素

JIS K 8040

  アセトン(残留農薬・PCB 試験用)

(試薬)

JIS K 8117

  ジクロロメタン(残留農薬試験用)

(試薬)

JIS K 8150

  塩化ナトリウム(試薬)

JIS K 8180

  塩酸(試薬)

JIS K 8251

  ガラスウール(試薬)

JIS K 8825

  ヘキサン(残留農薬・PCB 試験用)

(試薬)

JIS K 8987

  硫酸ナトリウム(試薬)

JIS R 3503

  化学分析用ガラス器具

JIS R 3505

  ガラス製体積計

JIS Z 0701

  包装用シリカゲル乾燥剤


13

K 0450-10-10

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附属書 1(規定)試験に使用する水の質の確認方法

序文  この附属書は,この規格の試料の前処理,試薬の調製,空試験などに使用する水が,ビスフェノー

ル A に相当する位置にピークのないことを確認する方法について規定する。

1. 

水の質の確認方法  この方法は,試料の前処理,試薬の調製,空試験などに使用する水について,本

体の 5.1 の溶媒抽出法に準じた操作を行った後,BSTFA による誘導体化を行い,試料の測定に用いるガス

クロマトグラフ質量分析計に導入し,ビスフェノール A に相当する位置にピークがないことを確認するも

のである。

1.1 

試薬  試薬は,次による。

a)

塩酸(1 mol/L)  本体の 5.1.1 b)による。

b)

硫酸ナトリウム  本体の 5.1.1 d)による。

c)

ジクロロメタン  本体の 5.1.1 f)による。

d)  N,O-

ビス(トリメチルシリル)トリフルオロアセトアミド(BSTFA)  本体の 5.3.1 j)による。

1.2 

器具及び装置  器具及び装置は,次による。

a)

分液漏斗  本体の 5.1.2 a)による。

b)

目盛付き共栓試験管  本体の 5.1.2 b)による。

c)

マイクロシリンジ  本体の 6.2 b)による。

d)

ガスクロマトグラフ質量分析計(GC/MS)  本体の 6.2 c)による。

e)

濃縮器  本体の 5.1.2 e)による。

f)

濃縮器用フラスコ  本体の 5.1.2 f)による。

g)

振とう器

1.3 

操作  操作は,次による。

a)

試験に使用する水[本体の 3.e)の A4(又は A3)の水]1 L を分液漏斗にとり,塩酸(1 mol/L)を加えて,

pH

を約 3 に調節し,ジクロロメタン 50 ml を加え,振とう器を用いて約 10 分間振り混ぜ,放置する。

b)

ジクロロメタン層を共通すり合わせ三角フラスコに移し,硫酸ナトリウム 10∼15 g を加え,軽く振り

混ぜて脱水し,ろ紙 5 種 A(又は 5 種 B)(

1

)

を用いてろ過し,ろ液を濃縮器用フラスコに受ける。

(

1

本体の

(

13

)

による。

c)

本体の 5.1.3 d)の操作を行う。

d)

濃縮液を目盛付き共栓試験管に移し,約 40  ℃の水浴中で加熱しながら,約 0.5 ml になるまで濃縮す

(

2

)

(

2

窒素を緩やかに吹き付けて行うとよい。この操作を行った場合には,本体の

(

17

)

による。

e)

この濃縮液に N,O-ビス(トリメチルシリル)トリフルオロアセトアミド(BSTFA)200 µl を加え,直ち

に栓をして振り混ぜた後,室温で約 1 時間放置して誘導体化する。

f)

この溶液 1 µl をマイクロシリンジでとり,本体の 6.3 a)及び c)の操作を行い,ビスフェノール A の保

持時間に相当する位置にピークのないことを確認する。


14

K 0450-10-10

:2006

     

附属書 2(規定)感度係数を用いる濃度の算出方法

序文  この附属書は,本体の 6.4 の検量線に代え,平均感度係数( RF )を求め,これによって試料中のビス

フェノール A の濃度を求める方法について規定する。

1. 

濃度の算出法  濃度の算出は,次による。

a)

本体の 6.4c)で得られた標準物質及びビスフェノール A-d

16

の指示値から,次の式によって各感度係数

(RF)

を算出する(

1

)

(

1

求めた各感度係数の値の相対標準偏差は 15 %以下でなければならない。

s

is

is

st

C

C

A

A

RF

×

ここに,

A

st

ビスフェノール A による指示値

A

is

ビスフェノール A-d

16

による指示値

C

is

検量線作成用標準液中のビスフェノール A-d

16

(

µg)

C

s

検量線作成用標準液中のビスフェノール A(

µg)

b)

各感度係数の平均値を求め,平均感度係数( RF )とする。

c)

次の式によってビスフェノール A の濃度(

µg/L)を算出する。

e

'

is

s

s

V

RF

A

I

A

N

×

×

×

ここに,

N

:  試料中のビスフェノール A の濃度(

µg/L)

A

s

:  試料中のビスフェノール A の指示値

A

is

:  添加したビスフェノール A-d

16

の指示値

I

s

:  添加したビスフェノール A-d

16

(

µg)

V

e

:  試料(L)


15

K 0450-10-10

:2006

     

附属書 3(参考)装置の定量範囲の下限値を確認する場合の方法

序文  この附属書は,本体に関連する事柄を補足するもので,装置の検出下限値から,定量範囲の下限値

を確認する方法を参考として示したものであり,規定の一部ではない。

1. 

定量範囲の下限値の算出方法  定量範囲の下限値の算出方法は,次による。

a)

本体の 6.1 d)のビスフェノール A 標準液(1

µg/ml)0.1 ml を全量フラスコ 10 ml にとり,本体の 6.1 g)

ビスフェノール A-d

16

内標準液(1

µg/ml-ジクロロメタン)1 ml を加え,ジクロロメタンを標線まで加え

る。この溶液 1 ml を共栓付き試験管にとり,目盛付き共栓試験管を,約 40  ℃の水浴中で加熱しなが

ら,濃縮液に窒素を緩やかに吹き付け,約 0.5 ml になるまで濃縮(

1

)

し,引き続き本体の 5.3.3  g)及び

h)

の操作を行う。

(

1

本体の

(

17

)

による。

b) 

この溶液の 1

µl をマイクロシリンジでとり,ガスクロマトグラフ質量分析計(

2

)

に導入し,

本体の 6.3 d)

e)

及び g)によって定量する。

(

2

)

本体の 6.3a)で調整したガスクロマトグラフ質量分析計を用いる。

c) a)

及び b)の操作を 5 回以上繰り返す。

d)

得られた測定値から,次の式によって標準偏差を求め,その 3 倍を装置の検出下限値(

3

)(

4

)

,10 倍を装

置の定量下限値(

4

)

とする。

(

)

1

2

i

n

x

x

s

å

ここに,

s

:  標準偏差

x

i

:  個々の測定値

x

:  測定値の平均値

n

:  測定回数

(

3

)

ここで得られた装置の検出下限値が,対象物質の定量下限値より大きい場合には,器具,機器

などを確認して,これらの値以下になるように調整する。

(

4

)

この装置の検出下限値及び定量下限値は,使用する装置の状態などによって変動するため,あ

る一定の周期で確認し,常に十分な値が得られるように管理する。また,使用する装置及び測

定条件を変更した場合などには,必ず確認する。